水产养殖病害检测系列试剂盒Q&A

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揭晓时间：2019-03-14 16:14

水产养殖病害检测系列试剂盒Q&A：

1. 取样随机误差性问题

(1) 病毒熏染量低情形下，可能部分虾体带病毒，部分虾体不带病毒，用取样袋大宗取样后，研磨混匀，可以提高带病毒虾体被收罗的概率；

(2) 大宗取样碾磨后，病毒被有稀释的可能，需要凭证现真相形酌情增添取样量�？梢运剂恳环菅�，分多个取样袋取样，举行多份PCR检测。

2. 样本的运输及生涯

鲜活虾苗即可举行核酸提取效果最好，若无法马上使用，建议-20℃冷冻生涯（可�。�可同时加入酒精延永生涯时间，加入酒精的样本，使用前应离心后吸弃酒精），一周内举行核酸提取。

3. 取样量问题

(1) 少量样本（30-50mg）直接放入离心管，碾磨，加入裂解液裂解，涡旋震荡混匀或上下摇匀，使样品完全疏散至裂解液中；

(2) 样本量较大情形下，放入取样袋充分碾磨，使样本混淆匀称，取30-50mg柱离心管，加入裂解液，涡旋震荡混匀或上下摇匀，使样品完全疏散至裂解液中；

4. 离心柱使用问题

(1) 裂解液中加入样本后，有可能会泛起液体过于粘稠的状态，若用这种粘稠液体举行离心会梗塞离心柱，这种情形下建议：继续加入适量裂解液，边加边摇匀，直至粘稠度适当，不影响离心柱的使用。

(2) 离心柱的最大装液量为750ul，若裂解完成的样本离心后体积凌驾750ul，建议分多次，用统一离心柱举行离心，每次离心弃网络管液体。

5. 提取到的核酸模板怎样贮存

提取到的核酸模板应连忙用于PCR扩增检测，建议剩余核酸模板-20℃贮存用于复检，RNA病毒核酸模板贮存不得凌驾3天（TSV/YHV/IMNV/CMNV），DNA病毒、细菌、肝肠胞虫核酸模板贮存不得凌驾1月，长时间贮存核酸浓度降低严重。

6. PCR加样要求

控制加样时间，提前设置反应程序，准备好所有完所有试剂、耗材（包括需要的种种冻干PCR试剂、复溶液、核酸模板、阴阳性比照模板、枪头等），并用标签笔对PCR管做好标记，所有准备事情做好之后，按说明书要求加入复溶液和核酸模板，连忙上机检测，包管加入复溶液、加入核酸模板、上机三个操作办法之间没有其它时间间隙。

注：1、加样完成后不可用手接触PCR管底；

2、冻干试剂自己松散多孔结构，在复溶历程中爆发的微气泡容易粘在管壁，上机前，振荡器涡旋震荡或手指轻弹PCR管，然后1,0,000rpm以上高速离心30s-1min，然后上机检测。

7. PCR扩增仪使用

(1) 使用前检查网络毗连是否正常，确保数据能够正常传输。

(2) 牢靠与PCR扩增仪举行数据传输的电脑，作废电脑自动休眠模式，避免数据丧失。